Odgrywa ważną rolę w procesach życiowych, fosforylując Tyrr, Ser, Thr, zlokalizowane na peptydach.Fosforylowany aminokwas jest powszechnie stosowany w produkcji peptydu kwasu fosforowego, obecnie stosowanego w pojedynczych aminokwasach fosforylowanych fenylem.HBTU/fosforylowane aminokwasy są powszechnie stosowane do łączenia fosforylowanych aminokwasów metodą HOBt/DIEA, ale peptyd kwasu fosforowego wybiera to podejście z defektami, szczególnie w przypadku generowanych znacznie dłuższych peptydów peptydowych lub fosforanów aminokwasów, wydajność łączenia jest niska, niska czystość produktu końcowego.W przypadku tego fosfopeptydu rozważaliśmy selektywne podejście po fosforylacji.Proces wytwarzania polega na selektywnym usuwaniu grup zabezpieczających łańcuchy boczne aminokwasów, które muszą być znakowane po syntezie peptydu.W przypadku Tyr, Thr może reagować bezpośrednio przy użyciu aminokwasów z niezabezpieczonymi łańcuchami bocznymi.-Ser (trt), usunięto ilościowo w środowisku 1% TFA/DCM.
Fosforylacja za pomocą podwójnego fosforynu benzenu, fosforynu i czterech azotów wytwarza się i aktywne półprodukty fosforoamidu i tetrazolu, połączone z grupą hydroksylową, a następnie w wyniku utleniania nadtlenku kwasowego fosforylu, reakcja kończy się.
Obecnie istnieją dwa główne typy modyfikacji peptydów fosforylowanych:
(1) bezpośrednie wprowadzenie umiarkowanie gwarantowanych fosforylowanych aminokwasów do sekwencji polipeptydowej;
(2) po wygenerowaniu żywicy na sekwencji peptydowej, do fosforylacji Ser, Tyr lub Thr hydroksylowego łańcucha bocznego.
1) będzie umiarkowanie gwarantować, że fosforylowane aminokwasy bezpośrednio wprowadzą sekwencję peptydową:
Oznacza to, że aminokwasy wymagające fosforylacji zostaną fosforylowane i odpowiednio wcześniej zabezpieczone przy użyciu (Thr, Ser lub Tyr), a następnie fosforylacja zostanie zawężona do punktu selekcji indeksu polipeptydowego w oparciu o normalny proces generowania SPPS .Metoda ta jest łatwa w obsłudze, stała się główną metodą modyfikacji fosforylowanych przedsiębiorstw peptydowych.
2) po żywicy wytworzonej na sekwencji peptydowej, do łańcuchów bocznych Ser hydroksyfosforylacji, Tyr lub Thr:
Dekoracja fosforylacyjna przy użyciu fosforylacji pojedynczego skurczu do metody polipeptydowej, ze względu na zawadę przestrzenną generowaną przez duże grupy w dekoracji łańcucha bocznego, fosforylacja aminokwasów jest trudna do kurczenia się wraz z łańcuchem peptydowym.W przyszłości wprowadzenie aminokwasów będzie trudniejsze, zwłaszcza w dekoracji zawierającej wiele miejsc fosforylacji, wytwarzanie stanie się niezwykle trudne, skład produktu końcowego będzie złożony, trudny do rozdzielenia, a wydajność wyjątkowo niska.
Dlatego też, gdy fosforylowanych jest wiele miejsc w łańcuchu peptydowym, można wybrać wygenerowanie sekwencji peptydowej na żywicy, a następnie fosforylować ją przez grupę hydroksylową łańcucha bocznego Ser, Tyr lub Thr: jej wytwarzanie obejmuje głównie selektywne usuwanie grupa zabezpieczająca łańcuch boczny, która wymaga rozpoznania aminokwasów po syntezie peptydu.W przypadku Tyr, Thr może bezpośrednio wykorzystywać łańcuchy boczne aminokwasów, które nie są chronione w odpowiedzi.
Baza zabezpieczająca łańcuchy boczne w środowisku 1% TFA/DCM może zostać usunięta ilościowo.W przypadku wybrania tej metody, aktywny związek pośredni fosforoamidyno-tetrazolowy można wytworzyć przy użyciu fosforoamidynu dibenzylu i tetrazolu, połączonych z grupą hydroksylową, a następnie utlenić z wytworzeniem grupy fosforylowej w środowisku nadtlenowym w celu zakończenia reakcji.
Czas publikacji: 8 września 2023 r